[作者]
金运敏傅润乔
医院麻醉科
（北京）
[摘 要]本文阐述了NO的抗血小板作用、NO不足或失活的原因及其与动脉血栓形成之间的关系。试图寻找预防和治疗动脉血栓的有效途径。
关键词内皮：S-亚硝基硫醇;NO合成酶：氧化应激
血管内皮源性NO不仅扩张血管，还具有重要的抗血小板作用。通过激活鸟苷酸环化酶(GC)，抑制磷酸肌醇P(P13)教酶、成少Ca2+内流、抑制环氧化酶，NO可抑制血小板激话、粘附和聚集。NO除来自血管内皮外，还来自血小板。在血小板血栓形成中血小板源性NO抑制血小板的补充，NO不足或失活可能导致动脉血栓形成，而NO不足或失活与内皮功能障碍及细胞外谷光甘肽过氧化酶(GPx-3,一种抗氧化酶)的缺乏有关，此酶催化氢与脂过氧化物的还原反应，抑制反应性氧与NO的氧化反应，这为预防和治疗动脉血栓性疾病提供了重要的理论依据。
一、内皮源性NO的抗血小板作用
在NO的抗血小板机制中，硫醇的作用十分重要，NO除了氧化硝酸盐、亚硝酸盐、与超氧离子反应形成过氧亚硝酸盐、以及在GC的作用下与亚铁血红素反应形成电转移性复合物外，NO、氧、过氧亚硝酸盐可与硫醇发生反应生成S-亚硝基硫醇(SNT）,SNT是NO的稳定储存器，通过S-亚硝基转移反应，使NO转移到或脱离结合蛋白库(如S-亚硝基血浆蛋白)。
内皮源性NO的抗血小板作用与前列环素类物质有显著区别，前列环素的作用依赖于cAMP，不影响血小板的粘附，NO供体抑制血小板糖蛋白bll/lla的形成，但不影响糖蛋白lb/IX的表达，表明其对血小板粘附的抑制可能是抑制Willebrand因子与糖蛋白bll/llla间的相互作用，含有Willebrand重组因子片段ARS45的S-硝基行生物能有效地抑制血小板的粘附与聚集，NO的这种作用主要取决于cGMP的生成。此外，NO还与过氧化物反应形成过氧硝酸盐，过氧硝酸盐又与酶反应形成3-硝基-酪氨酸残基，后者通过抑制血小板12-脂氧化酶和环氧化酶-1发挥着抗血小板作用。血红蛋白与NO的亲和力以及红细胞团的动力学作用也促进NO的抗血小板作用，后者使血小板接近血管内皮。
血小板的激活涉及到一个重要的信息通路-PI3教酶通路的激活。PI3激酶促进凝血酶的作用，使血小板产生不可逆性聚集，而SNT、S-亚硝基谷胱甘肚(SNG)等NO供体在cGMP的存在的情况下可抑制凝血酶受体激话肽对PI3激酶的教话从而抑制PI3撤酶的作用。
N-乙酰-L-半胱氨酸、SNT,S-亚硝基-N-乙酰-L-半胱氨酸增强内皮源性NO的抗血小板作用。它们既抑制凝血酶和U-(类似于TXA2)诱导的血小板表面P蛋白与CD63(溶酶体蛋白)的表达，也抑制Ca2+依赖性异型二聚纤维蛋白原结合糖蛋白bll/llla(a2b/β3)的形成。其原因除了Ca2+流出受到抑制Ca2+与纤维蛋白原的亲和力下降及结合位点减少外，主要是与血小板上GC的激话和cGMP的生成有关。在脱去内皮并有冠状动脉狭窄的狗的静脉内注入SNT、S-亚硝基血浆蛋白的研究表明，S-亚硝基血浆蛋白是体内重要的NO储存库，SNT在此生成，通过亚硝基转移反应，可使NO从细胞外的SNT转移到细胞内的NO受体上，S-亚硝基血浆蛋白可抑制血小板调节的循环血流减少、其抗血小板作用强于硝基血管扩张剂。在给冠脉痉挛的病人输人SNG(存在一定浓度的SNT)和肺高压的鼠吸入NO的实验中也得到相同的结论。
因此，内皮源性NO和NO供体具有重要的抗血小板作用，尤其是在有血管疾病的情况下。
二、血小板源性NO的抗血小板作用
正常情况下，生化激动剂和切应力的改变使血管内皮释放NO。当存在内皮功能障碍或内皮剥脱，尤其是在急性冠脉综合征(ACS)时，NO的血小板来源变得十分重要。在血小板和巨核细胞上发现有结构性的NO合成酶，用NO微电极测试发现，血小板源性NO不仅调节血小板的激话，而且在血小板血栓形成中可明显抑制血小板的补充。
促进血小板源性NO合成的因子有：抑制蛋白激酶的a-维生素E；增强NO合成酶表达的statins；增强NO合成的L-精氨酸；增强SNT合成并抑制NO氧化失活的细胞内硫醇库。环氧化酶抑制剂通过抑制细胞内Ca2+的流出来抑制NO合成酶，以减少血小板源性NO生成。在血小板源性NO与ACS的相关性研究中，ACS病人的血小板产生的NO明显少于稳定性心绞痛病人，NO的生成减少可能缘于动脉粥样硬化血栓性综合征的病理生理学因素。
三、NO不足与动脉血栓
NO抗血小板作用已在实验中得到了证实。但在动物实验中需要人为地制造血小板性血栓，在病人的研究中也存在偶然性，因为，ACS伴随的氧化应最本身可以使NO失活，使NO微电极探测不到NO，因此，这些资料支持但不能证明“NO的不足促进动脉血栓形成”的假说。在Freedman对儿童期经历脑卒中的两个孩子(一个在13月和22月分别出现了脑血栓，另一个在15月时遭受过短暂的脑缺血)的研究中，其遗传因素的常规分析呈阴性，在评估NO供体的治疗作用时发现，和无病的姐妹，父母及同龄孩子相比，NO供体不能削弱血小板P蛋白对凝血酶应答时的表达，也不能阻止ADP诱导的血小板聚集，病人和母亲缺乏抗氧化酶GPX-3。GPX-3是细胞外间隙中唯一的一种含二硫半胱氨酸的过氧化酶，负责血浆中多数氧过氧化物的还原，GPX-3是通过形成脂过氧硝酸盐并催化NO从SNT中释放，来防止脂过氧基的产生,后者可使NO失活。另外还发现，激活的血小板是反应性氧包括超氧化物和12-氧过氧化-5、8、10、14-廿烷四烯酸[12(S)-HpETE)的丰富来源。
四、反应性氧、NO失活与动脉血栓
NO是一个反应性的自由基，能参与几种氧化还原反应，一些反应调节NO的生物作用，另一些则抑制其活性。第一类反应包括NO与血红素铁的反应(如亚硝化反应)和在有氧存在或过氧硝酸盐介人的情况下NO与硫醇的反应，前者负责GC的激活，后者形成SNT以稳定NO的生物活性；第二类是NO失活反应，主要是指反应性氧介质的氧化反应，反应性氧介质包括超氧化物。氢过氧化物、来自脂过氧化物的脂过氧基以及前列腺素F2，许多血管性疾病中都存在这些介质，例如高血压、高胆固醉血症、糖尿病、有动脉粥样化性血栓形成的疾病以及伴有这些疾病的内皮功能障碍性疾病等。激活的血小板本身是反应性氧的丰富来源，理论上，激话血小板时依赖这种氧的氧化反应能自动放大并一直反应下去，由此推断抗氧化机制能抑制血小板聚集的无限扩展，内皮源性NO和血小板源性NO是抑制血小板激括与血小板补充的调节因子，抗氧化酶GPx-3是另一种调节因子，它与超氧化物歧化酶结合，使反应性氧介质失去活性，从而防止NO失活。NO与超氧化物反应生成过氧硝酸盐代表了另一种抑制血栓形成的机制，此反应通过三种途径进行：抑制超氧化物;抑制TXA2生成；抑制SNT依赖的TXA合成酶。血小板依赖的血栓反应是血管内过度氧化应教反应的原因和结果，而动脉血栓性疾病是这种血栓反应的临床写照，来自内皮细胞和血小板的NO调节着血小板的话性、粘附与聚集，是动脉血栓形成的重要抑制剂。
结语
因此，因氧化剂过量或抗氧化酶缺乏的氧化应教反应可使NO生成不足或失活，是动脉血栓形成的危险因素，努力恢复正常的血管氧化还原状态是减少动脉血栓形成的一种治疗途径。
文章来源：维普网
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